小動物活體光學(xué)成像系統(tǒng)是一種先進的科研工具,系統(tǒng)利用生物發(fā)光和熒光技術(shù),通過高靈敏度的制冷CCD相機配合特制的成像暗箱和圖像處理軟件,使研究人員能夠直接監(jiān)控活體生物體內(nèi)的細胞活動和基因行為;廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)研究及藥物開發(fā)等領(lǐng)域。
1.生物發(fā)光技術(shù)
標記細胞或DNA:通過將熒光素酶基因整合到細胞染色體DNA上,當(dāng)存在其底物熒光素時,即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象。
發(fā)光原理:熒光素酶在ATP及氧氣的存在條件下催化熒光素的氧化反應(yīng)而發(fā)光,這種光只有在活細胞內(nèi)存在,且光的強度與標記細胞的數(shù)目線性相關(guān)。
優(yōu)點:非侵入性、實時連續(xù)動態(tài)監(jiān)測體內(nèi)的各種生物學(xué)過程,減少實驗動物數(shù)量及降低個體間差異的影響,背景噪聲低,具有較高的敏感性。
2.熒光技術(shù)
標記方法:采用熒光報告基團進行標記。
激發(fā)發(fā)射:通過激發(fā)光激發(fā)熒光基團到達高能量狀態(tài)后產(chǎn)生發(fā)射光,常用的有綠色熒光蛋白(GFP)、紅色熒光蛋白DsRed及其它熒光報告基團。
特點:費用低廉、操作簡單,但信噪比較低,非特異性熒光產(chǎn)生的背景噪音使其靈敏度較低。
